Sehr schwankende Performance bei Anwendungssoftware

Hallo Expterten,

ich benötige bitte eure Unterstützung bei einer kleinen Serverumgebung mit < 20 Usern.

Auf dem alten Server liefen die Hauptanwendungen in relativ vernünftiger Geschwindigkeit mit den Anfang dieses Jahres erneuerten Clients.
Nun ist das Problem, dass seit der Umstellung auf den Cluster die Mitarbeiter bei der Hauptanwendung sehr schwankende Ladezeiten haben. Wenn es gut läuft ist die Ladezeit 15-20 Sekunden beim ersten Start. Weitere Module werden in ca. 1-3 Sekunden geladen. Wenn es schlecht läuft, sind es 5:40 Minuten!! Zwischendrin sind auch wieder manche Menüs schneller, manche seeehr langsam.
Das kuriose ist, dass es mal einen Tag schnell(er) ist, am nächsten Tag oder einige Tage später wieder (sehr) langsam. Und das auf alle Clients quer verteilt. Man kann keinen ausschließen und keine Regel ableiten.
Die zweite Hauptanwendung ist auch nicht schneller als mit dem alten Server und teilweise seeehr langsam; selten auch Abstürze.
2-3 Clients laufen noch über einen 100Mbit-Switch, aber selbst auf diesem läuft es mitunter in < 18 Sekunden Startzeit.
Heute kam bei einem User die Meldung, dass die Anwendung (welche per Netzlaufwerk startet), nicht installiert ist. Zugriff auf Netzlaufwerk funktionierte aber. Nach ab- und anmelden war das Netzlaufwerk auch wieder normal da und die Anwendung startete ohne Fehlermeldung.
Irgendwo ist der Wurm drin und ich finde keine Lösung

Rahmenbedingungen:
Alter Server 1 physisch, Server 2012R2, 32GB RAM, HDDs, SQL Express 2014, Awendungs- und "Fileserver"; hat prinzipiell ordentlich seinen Dienst getan, da aber Speicher knapp wurde und kein Support mehr vorhanden war, wurde dieser ersetzt.
Alter Server 2 physisch, Server 2008R2 als DC, DNS, DHCP; > 8 Jahre alt --> ersetzt

Neuer Server: relativ groß dimensioniert, da er einige Jahre halten soll:
Cluster-in-a-Box-Lösung mit 2 Nodes á 128GB RAM, 2x Xeon, gemeinsamer Storage-Pool mit 2 SSDs und 8 SAS-HDDs, Server 2019 Standard, Dual 10G-SMB-Verbindung untereinander für Failover und 1G-NICs für Management und Hyper-V-Anbindung der VMs.
1 Management Domäne für die beiden Nodes als Raid1 auf SSDs mit Hyper-V und DC1 auf Node01 und DC2 auf Node02
Folgende Rollen auf Failover-Cluster
Eine VM Server 2019 als DC, DNS, DHCP
Eine VM Server 2019 als Datenbank-Anwendungsserver 1 mit SQL Express 2017, 64GB RAM - für die Hauptanwendungen
Eine VM Server 2019 als "App-Server" (Backup, Printserver, USV, etc.)
Der Cluster wurde nach Vorgabe der IP-Adressen vom Hersteller vorkonfiguriert und ich habe nur die Rollen mit den Produktiv-VMs installiert.

Clients: PCs mit i5-9400, 8GB, HD Graphics 630, 500GB SSD, Win10 Pro 1903, Office 2013 bzw. 2016, .Net 4.8
Die Clients verbinden per Anmeldeskript die Netzlaufwerke. Die Laufwerksbuchstaben und Pfade wurden 1:1 übernommen

Bei der 1. Anwendung wurden die Daten mit dem Wartungs-Tool des Herstellers exportiert und am neuen Server importiert.
Bei der 2. Anwendung wurden alle Daten mit Robocopy kopiert
Domäne und Benutzer wurden alle neu angelegt
[weitere 10G-Verbindung vom Server Node01 zu NAS für Backup und USB-Verbindung zu RDX-Laufwerk - spielt aber hier vermutlich keine Rolle]

Meine bisherigen Lösungsversuche:
- Netwerkperformance getestet: Datei-Kopieren mit 130MB/s ok und mit iperf bei 941MBit/s auch ok
- Virenscanner (Trend Micro Worry-Free Business Security) erst deaktiviert und später komplett deinstalliert. Beim Defender die relevanten Verzeichnisse als Ausnahmen hinzugefügt, testweise deaktiviert.
- verschiedene Einstellungen beim dynamischen Arbeitsspeicher auf den Clients probiert
- aktuelle (Treiber-) Updates und Windows-Updates installiert
- Anwendung direkt auf Server installiert. Das läuft (bisher) immer recht flott.
- Client direkt an "Core-Switch" angeschlossen
- Windows-Firewall (testweise) deaktiviert und Sophos XG135 noch nicht in Betrieb genommen
- mehrere Tickets bei verschiedenen Herstellern mit teilweise mehrstündigen Remote-Sitzungen und jeder sagt im Endeffekt: Keine Ahnung an was es liegt bzw. verweist an einen anderen
(geprüft wurden diverse Versionen, Datenbank-Checks, Zugriffsberechtigungen, Freigaben, Netzwerkgeschwindigkeiten)

Mein Ziel:
Jeder Mitarbeiter kann zeitnah in vernünftiger Geschwindigkeit fortwährend stabil arbeiten

Evtl. Vermutungen:
- Netzwerkeinstellungen mit Hyper-V, virtuellem Switch oder ähnlichem
- Dateien wurden vom alten Server irgendwie falsch kopiert (Berechtigungen, ...?)
- Probleme bei den Softwareherstellern (Laufzeitumgebung, Windows 10, Updates, ...???)

Ich wäre euch sehr dankbar, wenn ihr den einen oder anderen konkreten Tipp für mich habt und ich dieses Problem irgendwie gelöst bekomme.

Vielen Dank vorab!
grille-server